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流式细胞分析

服务简介
        流式细胞仪(FCM)是集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。活细胞表面保留有较完整的抗原或受体，先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合，再用荧光标记的第二抗体结合，根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行精确分类，还能分离纯化某一群或亚群细胞。其检测结果以直方图、二维图或假三维图显示。请预先准备检测样品和抗体，亦可委托本公司准备样品与抗体，法贝生物提供检测方法、图片与必要的数据。
操作步骤
制备活性高的细胞悬液(培养细胞系、外周血单个核细胞、胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法)
用10％FCS　RPMI1640调整细胞浓度为 5×10(6)～1×10(7)/ml
取40μl细胞悬液加入预先有特异性McAb(5～50μl)的小玻璃管或塑料离心管，再加50μl 1∶20(用DPBS稀释)灭活正常兔血清
用洗涤液洗涤2次，每次加洗涤液2ml左右 1000rpm×5min
弃上清，加入50μl工作浓度的羊抗鼠 (或兔抗鼠)荧光标记物，充分振摇
用洗涤液洗涤2次，每次加液2ml左右 1000rpm×5min
加适量固定液(如为FCM制备标本，一般加入 1ml固定液，如制片后在荧光显微镜下观察，视细胞浓度加入100～500μl固定液)
FCM检测或制片后荧光显微镜下观察 (标本在试管中可保存5～7天)

服务范围
1、DNA倍体分析，DNA含量分析；
2、细胞周期分析，?细胞凋亡细胞表面抗原分析及凋亡基因（P53、CD95、c-erb B2、Bcl-2及Bax）
3、耐药基因检测（p170、MRP、LRP）
4、细胞内钙离子测定
5、细胞氧化状态测定（ROS）
6、血小板功能的测定:CD62P 、CD41a

客户提供
1、需提前预约，样本要求为单细胞悬液或外周血，并请提供样本来源及处理方法等信息，同时说明实验目的、方法等；
2、荧光探针和抗体等由用户提供，也可委托我公司代购，用户所提供抗体应可与样本发生特异性识别反应。