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单克隆抗体制备

1. 服务简介
        单克隆抗体即把产生抗体的Ｂ淋巴细胞与多发性骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。既有骨髓瘤细胞无限生长的能力，又有Ｂ淋巴细胞产生抗体的功能。能在细胞培养中产生大量单一类型的高纯度抗体。单克隆抗体技术的应用，是免疫学中的一次革命，与常规的抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性非常明显。

2. 单克隆抗体制备服务套餐

套餐一	客户提供抗原
客户提供	交付标准	周期	价格
1、抗原信息 2、大于3mg抗原 3、其他详细要求	1、1-4株单克隆细胞株，ELISA效价大于1:20000 2、每细胞株提供5ml细胞培养上清 3、实验报告	22-24周	19800元

套餐二	法贝合成抗原
客户提供	交付标准	周期	价格
1、抗原详细信息 2、其他详细要求	1、1-4株单克隆细胞株，ELISA效价大于1:20000 2、每细胞株提供5ml细胞培养上清 3、3mg免疫用多肽 4、实验报告	24-26周	21800元

套餐三	小分子（农药、重金属、抗生素以及其他小分子化合物）抗原
客户提供	交付标准	周期	价格
1、抗原详细信息 2、抗原的小分子标准品 3、其他详细要求	1、1株单克隆细胞株，ELISA效价大于1:8000 2、每细胞株提供5ml细胞培养上清 3、3mg免疫及筛选用抗原 4、实验报告	26-28周	24800元

3. 生产流程

第一阶段：免疫小鼠
设计实验方案	需提供详细的实验要求	2工作日
抗原合成及偶联	小分子/多肽/蛋白质均可作为抗原物质	2-3周
免疫实验动物	5只6-8周龄BALB/C小鼠，Elisa检测即时效价	5-7周
Elisa检测	以免疫原为抗原样品，保证Elisa检测效价1：10000以上	1周
第二阶段：单克隆杂交瘤细胞株的建立
细胞融合	取小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选阳性克隆
克隆扩增和初选	扩增并低温保存一个成功融合的产物
亚克隆	有限稀释法亚克隆至形成稳定的单克隆融合细胞株
抗体鉴定	测定上清抗体亚型、特异性、抗体中和反应性及抗体配对参数
腹水制备/转瓶培养	依据客户要求，提供不同种类服务
抗体纯化	利用Protein A亲和纯化
验收标准
提供的杂交瘤培养物的腹水（或上清液）与顾客方提供的抗原样品有特异性结合，同时抗体特异性只针对客户方提供的抗原样品做出保证
最终交付
2-3株杂交瘤细胞株和少量腹水（或上清液），需要纯化的的服务提供纯化后抗体，并给出相应的鉴定报告（包括单抗的亚型）

4. 服务提示
        抗体制备服务，存在着一个最令人困扰的遗憾，即产生的抗体与免疫抗原有着非常特异的、灵敏的反应，但是对于检测抗原，Western Blot经常出现阴性实验结果，浪费了宝贵的时间和经费。
        这种遗憾来主要来自于抗原设计不合理，依据当前的抗体设计及制备技术水平，最好的办法就是提高抗原特异性，法贝抗体技术专家建议以下方案：
A.使用多肽为抗原时，利用软件分析抗原的亲水性和疏水性，预测蛋白虚列膜外区和胞内区。尽量使用亲水性裸露在膜外的多肽区域，必要时，选择两条以上的多肽作为抗原。
B.尽量使用天然蛋白或重组蛋白（部分区域）作为免疫抗原，可以大大提高抗原的特异性，减少遗憾。